基本信息

英文名稱：PNU-159682

CAS號：202350-68-3

分子式：C32H35NO13

分子量：641.62

EINECS號：

MDL No.：MFCD12756329

屬性

沸點(diǎn) 838.5±65.0 °C(Predicted)

密度 1.58±0.1 g/cm3(Predicted)

儲存條件 under inert gas (nitrogen or Argon) at 2–8 °C

酸度系數(shù)(pKa)7.34±0.60(Predicted)

PNU-159682生物活性

描述 PNU-159682是一種高效的蒽環(huán)類新霉素代謝產(chǎn)物，具有突出的細(xì)胞毒性，是一種有效的 ADC細(xì)胞毒素。

相關(guān)類別

信號通路 >> 抗體- 藥物偶聯(lián)物 >> ADC細(xì)胞毒素

研究領(lǐng)域 >> 癌癥

體外研究 PNU-159682抑制一組人腫瘤細(xì)胞系，IC70值在0.07-0.58 nM范圍內(nèi)，分別比MMDX和多柔比星的效力高2,360至790倍和6,420至2,100倍[1]。 PNU-159682（100μM）弱抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶II解除活性。 PNU-159682（10μM）-DNA加合物含有一個或兩個與雙鏈DNA結(jié)合的藥物分子[2]。 PNU-159682對表達(dá)CAIX的SKRC-52細(xì)胞顯示出細(xì)胞毒性作用，IC50為25 nM [3]。

體內(nèi)研究 PNU-159682（15μg/ kg，iv）顯示在攜帶播散性小鼠L1210白血病的小鼠和4μg/ kg的MX-1人乳腺癌異種移植物中的抗腫瘤活性[1]。 PNU-159682（25 nmol / kg）在攜帶SKRC-52異種移植腫瘤的小鼠中表現(xiàn)出有效的抗腫瘤作用[3]。

溶解度

體外：

在DMSO中10mM

儲備液

1 mM 1.5586 mL 7.7928 mL 15.5855 mL

5 mM 0.3117 mL 1.5586 mL 3.1171 mL

10 mM 0.1559 mL 0.7793 mL 1.5586 mL

激酶實(shí)驗(yàn) 通過利用該酶降解運(yùn)動蛋白DNA（kDNA）的能力來測試拓?fù)洚悩?gòu)酶II活性的抑制;該試驗(yàn)對拓?fù)洚悩?gòu)酶II（α和β）的兩種同種型都是特異性的，因?yàn)樗蕾囉阪溄拥腄NA轉(zhuǎn)化為其螯合形式，這需要雙鏈切割和由拓?fù)洚悩?gòu)酶II獨(dú)特地進(jìn)行連接。在該測試中使用的DNA是Crithidia fasciculata的線粒體kDNA，其是DNA環(huán)的鏈接網(wǎng)絡(luò)，其中大多數(shù)是2.5kb單體。 kDNA網(wǎng)絡(luò)相對于單體而言較大并且不會在保留在孔中的凝膠中遷移，而小環(huán)可以容易地在瓊脂糖凝膠中分離。凝膠和運(yùn)行緩沖液都含有嵌入劑溴化乙錠，可以用紫外光源監(jiān)測單體外觀和不同DNA形式的分辨率（線性，帶切口的環(huán)狀DNA和松弛的DNA單體），有助于清楚地區(qū)分來自帶切口的環(huán)狀DNA的線性DNA。在該測試中，將200ng的kDNA在37℃下與10,1或0.1μM的阿霉素一起孵育1小時，或者在0.025U的人拓?fù)洚悩?gòu)酶存在下以100,10或1μM的PNU-159682孵育1小時。 IIα在拓?fù)洚悩?gòu)酶II反應(yīng)緩沖液中（Tris-HCl pH 7.9 40mM，KCl 80mM，DTT 5mM，BSA15μg/ mL，ATP 1mM和MgCl 2 10mM）。在孵育期結(jié)束時，向每個樣品中加入3μL凝膠上樣緩沖液（二甲苯藍(lán)0.25％，藍(lán)色溴酚0.25％，F(xiàn)icoll 400 18％和EDTA 6mM），然后用瓊脂糖（1％）凝膠分析。電泳。在溴化乙錠0.5μg/ mL的存在下，在TBE緩沖液（Tris 89mM，硼酸89mM，EDTA 2mM，pH 8.0）中進(jìn)行運(yùn)行。樣品以1V / cm的速度過夜。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 將SKRC-52細(xì)胞接種于96孔板中的RPMI中，加入10％FCS（100μL），密度為每孔5000個細(xì)胞，并使其生長24小時。用含有不同濃度的測試物質(zhì)（1：3稀釋步驟）的培養(yǎng)基替換培養(yǎng)基，并在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下培養(yǎng)板。 72小時后，除去培養(yǎng)基，加入在150μL培養(yǎng)基中的MTS細(xì)胞活力染料（20μL），將培養(yǎng)板在培養(yǎng)條件下孵育2小時，并在Spectra Max Paradigm多模板讀數(shù)器上測量490nm處的吸光度。 。實(shí)驗(yàn)一式三份進(jìn)行，平均細(xì)胞存活率計(jì)算為測量的背景校正吸光度除以未處理對照孔的吸光度。通過將數(shù)據(jù)擬合到四參數(shù)邏輯方程，使用Prism 6軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析來確定IC 50值。

動物實(shí)驗(yàn) 使用4-6周齡雌性CD-1無胸腺裸鼠評估PNU-159682對MX-1人乳腺癌異種移植物的活性。在第0天，用右側(cè)脅腹的MX-1腫瘤片段皮下移植動物（n = 14）。 8天后，將它們隨機(jī)分配到藥物治療組或?qū)φ战M（每組n = 7只小鼠），并開始治療。 PNU-159682根據(jù)q7dx3（三次劑量每7天）給予iv（4μg/ kg）時間表;對照動物接受鹽水注射。用卡尺測量估計(jì)腫瘤體積;其中D和d分別是最長和最短的直徑。出于倫理原因，對照動物在第21天被處死，此時該組的平均腫瘤體積約為2,500 mm3;監(jiān)測接受藥物治療的動物直至第50天，此時將它們處死。

存儲

4°C，在氮?dú)庀聝Υ?/span>

運(yùn)輸 室溫;可能會有所不同

SMILES COC1=C(C(C(C(O)=C([C@@H](O[C@H]2C[C@H]3[C@H](O[C@H]4N3CCO[C@@H]4OC)[C@H](C)O2)C[C@@](C(CO)=O)(O)C5)C5=C6O)=C6C7=O)=O)C7=CC=C1

參考文獻(xiàn)

[1]. Quintieri L, et al. Formation and antitumor activity of PNU-159682, a major metabolite of nemorubicin in human liver microsomes. Clin Cancer Res. 2005 Feb 15;11(4):1608-17.

[2]. Scalabrin M, et al. Virtual Cross-Linking of the Active Nemorubicin Metabolite PNU-159682 to Double-Stranded DNA. Chem Res Toxicol. 2017 Feb 20;30(2):614-624.

[3]. Cazzamalli S, et al. Acetazolamide Serves as Selective Delivery Vehicle for Dipeptide-Linked Drugs to Renal Cell Carcinoma. Mol Cancer Ther. 2016 Dec;15(12):2926-2935.

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